SK-N-MC細胞是一種人類神經源性細胞系，最早于1971年9月由Biedler JL分離自一位14歲白種女童的眼眶上區(qū)神經上皮瘤轉移灶。最初被認為是神經母細胞瘤細胞系，但后續(xù)研究表明該細胞系實際上源于Askin腫瘤。常用于神經系統(tǒng)疾病及腫瘤生物學研究。

SK-N-MC細胞是一種假二倍體細胞系，雌性（XX）染色體，染色體數(shù)目主要在二倍體范圍內，模式染色體數(shù)為46。在染色體組成方面，SK-N-MC細胞表現(xiàn)出多種異常，缺失N3和N10染色體，部分染色體如N1、N2、N4等為單體，同時出現(xiàn)多個標記染色體，包括1p+、11q+等。其中特定標記染色體與R.C.Seeger等研究中提到的相符。

SK-N-MC細胞特性特征

酶活性：SK-N-MC細胞具有中度的多巴胺-β-羥化酶活性，能夠合成和代謝兒茶酚胺。

熒光誘導：用甲醛處理后可誘導出熒光，表明SK-N-MC細胞內存在兒茶酚胺。

抗原與基因特征：血型：O型血；Rh+。

同工酶表達：AK-1，1；ES-D，2；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，2；PGM1，1；PGM3，1-2

致瘤性：SK-N-MC細胞在倉鼠的臉頰和裸小鼠身上形成腫瘤。

轉移性：主要發(fā)生在眶上區(qū)

SK-N-MC細胞復蘇

將水浴鍋預熱至37℃，并準備4 mL培養(yǎng)基（MEM + 10% FBS + 1% P/S）。

迅速將SK-N-MC細胞的凍存管放入37℃水浴中，解凍時間應控制在1分鐘左右。

解凍后，立即用4 mL培養(yǎng)基稀釋細胞懸液，輕輕混勻，以確保SK-N-MC細胞均勻分布。

在1000 RPM條件下離心4分鐘，棄去上清，以去除解凍過程中的雜質。

用1-2 mL新鮮培養(yǎng)基重懸SK-N-MC細胞，并將細胞懸液轉移至培養(yǎng)瓶中。

將培養(yǎng)瓶置于37℃、5% CO?的培養(yǎng)箱中過夜培養(yǎng)，確保SK-N-MC細胞能夠順利貼壁。

SK-N-MC細胞傳代

當SK-N-MC細胞的密度達到80%-90%時，進行傳代操作。

棄去舊的培養(yǎng)基，用無鈣鎂的PBS輕輕洗滌SK-N-MC細胞1-2次，以去除殘留的培養(yǎng)基成分。

加入1 mL消化液（0.25%胰酶 + 0.53 mM EDTA），覆蓋SK-N-MC細胞表面，并放置于37℃培養(yǎng)箱中1-2分鐘。

觀察SK-N-MC細胞變圓并脫落后，立即加入培養(yǎng)基終止消化過程。

在1000 RPM條件下離心4分鐘，棄去上清，確保SK-N-MC細胞的完整性。

用新鮮培養(yǎng)基重懸SK-N-MC細胞，并按1:2的比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中，補加8 mL培養(yǎng)基。

SK-N-MC細胞凍存

當SK-N-MC細胞生長狀態(tài)良好時，準備進行細胞凍存。凍存液配方為55%培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO。

棄去培養(yǎng)基后，用PBS清洗SK-N-MC細胞，然后加入胰酶進行消化。

細胞回縮脫落后，加入凍存液終止消化反應。

在1000 RPM條件下離心4分鐘，棄去上清后，用凍存液重懸SK-N-MC細胞，確保DMSO濃度為10%。

將SK-N-MC細胞懸液分裝至凍存管中，并使用程序降溫盒在-80℃預凍2小時，隨后轉移至液氮中長期保存。

人神經上皮瘤細胞的應用場景非常廣泛，包括但不限于基礎研究、藥物開發(fā)、毒性測試和生物標記物篩選。在基礎研究中，科學家們利用這種細胞系探索神經母細胞瘤的分子機制；在藥物開發(fā)中，SK-N-MC細胞用于篩選和評估潛在的治療藥物；在毒性測試中，這種細胞系可以幫助評估化合物對神經細胞的毒性效應；在生物標記物篩選中，SK-N-MC細胞可用于發(fā)現(xiàn)和驗證與神經母細胞瘤相關的生物標記物。  總之，人神經上皮瘤細胞（SK-N-MC）是一種重要的科研工具，具有廣泛的應用前景和研究價值。通過合理使用和嚴格管理，這種細胞系可以為神經生物學和癌癥研究提供有力的支持